| 目的 基于肝X受体α(liver X receptor alpha,LXRα) 信号通路探讨八宝丹防治乳腺癌内分泌治疗相关性血脂异常的作用机制。 方法 30 只SPF 级 BALB/c 雌性裸鼠适应性喂养1 周后,6 只不予任何干预,24 只以160 mg/(kg· d) 腹腔注射二氧化乙烯基环己烯 (4-vinylcyclohexene dioxide,VCD) 溶液, 连续干预16 d。 从VCD 干预的24 只小鼠中选取体重接近、 状态较好的18 只裸鼠, 建立人乳腺癌细胞 MCF-7 荷瘤模型, 通过酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH) 及雌二醇(estradiol,E2 ) 水平, 并采用瑞氏染色法观察小鼠阴道细胞形态学改变, 验证造模是否成功。 将造模成功的18 只裸鼠随机分为模型组、 内分泌组、 联合组, 每组6 只。 空白对照组: 全程无干预(作为基础血脂水平参照) ; 模型组: 造模后不予额外给药; 内分泌组: 予以来曲唑溶液1 mg/(kg· d) 腹腔注射, 连续干预3 周; 联合组: 在上述来曲唑溶液腹腔注射的基础上, 予以八宝丹溶液125 mg/(kg· d) 灌胃, 连续干预3 周。 药物干预3 周后, 取裸鼠肿瘤, 测量瘤重、 瘤体体积并计算肿瘤生长抑制率。 采用生化检测法测定血清总胆固醇(total cholesterol,TC) 、 甘油三酯(triglyceride,TG) 、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C) 、高密度脂蛋白胆固醇 (high-density lipoprotein cholesterol, HDL-C) 、 丙 氨 酸 转 氨 酶 (alanine aminotransferase,ALT) 、 天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST) 水平; 以 HE 染色观察肝脏组织病理表现; 以硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA) 法检测丙二醛(malondialdehyde, MDA) 含量、羟胺法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD) 活力;ELISA 检测肝组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosisfactor-alpha,TNF-α) 、 白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6) 含量; 免疫组化法检测肝脏组织中 LXRα、ATP 结合盒转运体 A1(ATP binding cassette transporter A1,ABCA1) 、ATP 结合盒转运体 G5(ATP binding cassette transporter G5,ABCG5) 、 胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase, CYP7A1) 蛋白表达。 结果 造模结束后, 与空白对照组相比,VCD 抑制剂干预组 FSH 含量显著升高(P <0.05) ,E2 含量降低(P <0.05) ,VCD 抑制剂干预组无明显的动情周期性细胞形态变化; 提示造模成功。 总体抑瘤效果方面, 内分泌组小鼠瘤体体积低于模型组(P <0.05) , 联合组瘤体体积低于内分泌组(P <0.05) ; 与模型组相比, 内分泌组瘤重下降(P <0.05) , 联合组瘤重低于内分泌组(P <0.05) , 且联合组瘤体抑制率高于内分泌组(P <0.05) 。 肝脏病理表现方面, 联合组炎症细胞浸润减少, 优于内分泌组。 生化指标方面, 与空白对照组相比, 模型组 TC 含量明显升高(P <0.05) ; 与模型组相比, 内分泌组ALT、TC、LDL-C、AST、TG 含量均显著升高(P 均<0.05) , HDL-C 含量显著降低(P <0.05) ; 与内分泌组相比, 联合组 ALT、TC、LDL-C、AST、TG 含量降低(P 均<0.05) , HDL-C 含量升高(P <0.05) 。与空白对照组相比, 模型组血清SOD 含量稍降低, MDA 含量稍升高, 差异均无统计学意义(P >0.05) ; 与模型组相比, 内分泌组血清SOD 含量降低(P <0.05) ,MDA 含量升高(P <0.05) ; 与内分泌组相比, 联合组血清SOD 含量升高(P <0.05) ,MDA 含量降低(P <0.05) 。 与空白对照组相比, 模型组 TNF-α、IL-6 含量均稍升高, 差异均无统计学意义(P >0.05) ; 与模型组相比, 内分泌组血清 TNF-α、IL-6 含量明显升高(P均<0.05) ; 与内分泌组相比, 联合组血清 TNF-α、IL-6 含量明显降低(P 均<0.05) 。 与空白对照组相比, 模型组LXRα、ABCA1、ABCG5、CYP7A1 阳性表达率均稍降低, 差异均无统计学意义(P >0.05) ; 与模型组相比, 内分泌组LXRα、ABCA1、ABCG5、CYP7A1 阳性表达率均降低(P 均<0.05) ; 与内分泌组相比, 联合组LXRα、ABCA1、ABCG5、CYP7A1 阳性表达率均显著增强(P 均<0.05) 。 结论 八宝丹可通过促进 LXRα介导的 ABCA1、ABCG5、CYP7A1 信号分子表达, 促进胆固醇外排和转化, 减轻炎症反应, 提高氧化应激能力, 促使血脂水平下降, 从而防治乳腺癌内分泌治疗相关性血脂异常。 |